嘔吐毒素親和柱檢測原理：測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)。DON單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上，樣品中的DON經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢的通過DON嘔吐毒素親和柱。在嘔吐毒素親和柱內(nèi)，毒素與抗體結(jié)合，之后洗滌嘔吐毒素親和柱除去沒有被結(jié)合的雜質(zhì)，用甲醇洗脫DON。
嘔吐毒素親和柱的檢測過程解析：
一：樣品前處理
稱取10g 面粉加入100ml 水，高速均質(zhì)1 分鐘，用玻璃纖維濾紙過濾至澄清，取2ml 濾液作為待上樣液。
二：檢測前的準(zhǔn)備和注意事項(xiàng)
1. 將所需的免疫親和柱在使用前回溫至室溫（20-25℃）。
2. 免疫親和柱的上下端有塑料塞子，在使用時(shí)可以取下。
3. 在使用的過程中避免免疫親和柱的干燥。例外情況為洗脫前短暫的排空和洗脫后的*排空
4. 過高的壓力或真空提取設(shè)備產(chǎn)生的負(fù)壓會壓緊凝膠而導(dǎo)致回收率降低。
三：嘔吐毒素親和柱操作過程
• 將5ml 或10ml 注射器連接于免疫親和柱上端（通過小柱連接件）。
• 2ml 處理好的樣品液以1-2 滴/ 秒的速度通過親合柱，棄掉流出的液體。
• 以5ml 水淋洗柱子一次，棄掉流出的液體。
• 利用真空設(shè)備壓入空氣（約10 秒），確保排除所有的液體。
• 用1ml 甲醇緩慢洗脫（流速約為2-3 秒每滴），殘留的洗脫液使用空氣壓出或真空抽出（30 秒）并將洗脫液收集于干凈的收集管中。
• 將洗脫液吹干后加入1ml 流動相復(fù)溶，用于液相色譜檢測。
微信公眾號
訪問手機(jī)端
